Puritate HPLC
Actualizat
Cromatografia lichidă de înaltă performanță (HPLC) este standardul industriei pentru măsurarea purității peptidelor. Când o peptidă are un procent de puritate HPLC declarat, acea cifră ar trebui să provină de la un sistem HPLC calibrat, de regulă cu o coloană C18 cu fază inversă și detector UV la 214 nm sau 220 nm. Fiecare vârf din cromatogramă reprezintă o specie moleculară distinctă; aria de sub vârful țintă, exprimată ca procent din aria totală a vârfurilor, este cifra de puritate. Pentru peptidele de cercetare, valorile foarte mari de puritate ar trebui totuși analizate împreună cu testele suplimentare de lot care au fost efectuate în realitate, fără a trata puritatea drept dovadă a identității moleculare. Alegerea lungimii de undă de detecție UV contează: 214 nm captează direct absorbția legăturii peptidice și este setarea cea mai universală pentru peptide; 220 nm este uneori folosită pentru a reduce zgomotul fazei mobile, dar subestimează absorbanța pentru peptidele fără resturi aromatice. HPLC în gradient, cu variația compoziției fazei mobile în timp, separă specii foarte apropiate, precum secvențe trunchiate cărora le lipsește un rest, variante oxidate sau resturi racemizate, care ar eluta împreună în condiții izocratice. Raportul complet de puritate dintr-un certificat de analiză ar trebui să includă tipul coloanei, faza mobilă, programul de gradient, debitul, lungimea de undă de detecție, timpul de retenție al vârfului țintă și o copie a cromatogramei. Analizarea tuturor acestor elemente este singurul mod de a înțelege ce înseamnă o cifră de puritate declarată pentru lotul respectiv. Peptra Labs consemnează acești parametri în informațiile COA disponibile pentru loturile eligibile.
Legături
- Peptidă
- Certificat de analiză (COA)
- Spectrometrie de masă (MS)
Ultima actualizare: 4 mai 2026